①直接ELISA；②间接ELISA；③夹心ELISA；④竞争ELISA；⑤竞争抑制ELISA。其他的ELISA都隶属于这五类ELISA或由这五类ELISA组合衍生。
1．直接ELISA
其方法是将按一定的比例稀释好包被到固相载体上，然后加入稀释好的的酶标抗体，孵育后加入底物显色并判读结果。直接ELISA操作很简单，步骤也比较简练，但是其还是非常有限的，一个重要的原因是这种ELISA中只经过了一步（酶的放大），所以其灵敏度不是很高；另外，其测定的对象也非常有限，只能测定的分子。
2．间接ELISA
间接ELISA与直接ELISA不同的是，间接ELISA中与包被好的抗原结合的是非酶标抗体，另外第二种抗体（即二抗）。二抗是经过酶标的，它可以与第一种抗体，最后加入底物显色并判读结果。由于二抗一般为多抗，因此，一个分子上可以结合多个二抗分子，同时，一个二抗分子上可以标记上多个酶分子，所以当待测抗体为多抗时，信号经过两步放大，最终提高了检测的灵敏度。另外，由于二抗制备比较容易，而且很早就开始商品化，所以操作者无需要将一抗进行酶标，大大缩减了工作量。在检测抗体的、血清的效价以及的筛选过程中，间接ELISA都是非常重要的实验过程，在中，间接ELISA也是检测标志性抗体的重要手段。
3．夹心ELISA
夹心ELISA总体上可以分为两种，直接夹心ELISA和间接夹心ELISA。
直接夹心ELISA又分为双抗体夹心ELISA和双抗原夹心ELISA。
双抗体夹心ELISA的方法是将第一种抗体（捕获抗体）包被在固相载体上，封闭后加入待检抗原，温育后加入第二种抗体（检测抗体），捕获抗体和检测抗体可以是针对不同的两种，也可以是针对同一抗原的一种单抗与一种多抗，但是检测抗体需要经过酶标。
双抗原夹心ELISA的原理和操作与双抗体夹心ELISA基本相同，不同的是包被的是抗原，待检对象是抗体，然后加入酶标抗原，再加底物显色。
对于双抗体夹心ELISA，待检对象必须包括两个或者两个以上的表位，否则检测抗体无法与待检抗原结合，例如和抗原都是不能用双抗体夹心ELISA检测的。对于双抗原夹心ELISA，其操作与间接ELISA基本相同，但利用特异性的抗原代替酶标二抗，所以特异性比间接法更好。另外，由于间接ELISA中使用的二抗一般只能识别，而双抗原夹心ELISA中任何类似的都可以被检测出，因此，双抗原夹心ELISA比间接ELISA也更灵敏。
间接夹心ELISA是基于两种不同种属来源的的夹心ELISA，其原理是将一种种属来源的特异性抗体包被于固相载体上（作为捕获抗体），封闭，加入待检抗原，温育，洗涤后加入另一种种属来源的特异性抗体（非酶标，作为检测抗体），最后加入酶标二抗（检测抗体），再加底物显色。与直接双抗夹心ELISA相比，间接夹心ELISA中引入了特异性识别检测抗体的酶标二抗，相当于整个体系的信号增加了一步放大系统，于是最终的结果比直接双抗夹心ELISA更灵敏。同时，由于间接夹心ELISA中的酶标二抗仅能识别检测抗体，而不能识别捕获抗体，所以体系的特异性也得到了保障。
4．竞争ELISA
本法首先将特异性抗体吸附于固相载体表面，经洗涤后分成两组：一组加酶和被测抗原的；而另一组只加酶标记抗原，再经孵育洗涤后加底物显色，这两组底物降解量之差，即为所要测定的未知抗原的量。这种方法所测定的抗原只要有一个即可，因此，对小分子抗原如和药物之类的测定常用此法。
5．竞争抑制ELISA
预先将抗原包被在固相载体上，实验时加入稀释好的待检抗原（或抗体），然后依次加入特异性的抗体以及此抗体对应的酶标二抗。待检标本中的抗原（或抗体）就和预制备体系中固相载体上结合的抗原（或抗体）竞争结合特异性的抗体（或固相载体上结合的抗原）。洗掉被竞争的特异性抗体，最后加底物显色。最终显色的结果与待检抗原（或抗体）量呈。
